Диссертация - Внеклеточные оксидоредуктазы лигнинолитического комплекса базидиального гриба Trametes Pubescens (Schumach. ) Pilat |
Содержание |
Оглавление
СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ...4
ВВЕДЕНИЕ...5
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР...9
1.1 ЛИГНИНОЛИТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ...9
1.1.1 Лигнинолитический комплекс грибов...9
1.1.2 Множественные формы лигнинолитических ферментов...10
1.1.3 Синергизм действия лигнинолитических ферментов, роль марганца в процессе деградации лигнина...13
1.2 Основные ферменты лигнинолитического комплекса базидиомицетов...18
1.2.1 Лакказа...18
1.2.2 Лигнинпероксидаза...34
1.2.3 Марганецпероксидаза...37
1.3 Базидиальные грибы рода Trametes...41
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...45
2.1 Материалы и объекты исследования...45
2.1.1 Штаммы микроорганизмов и ферменты...45
2.1.2 Носители для хроматографии...45
2.1.3 Реагенты...45
2.2 Культивирование базидиомицета Trametes pubescens...46
2.2.1 Культивирование на глюкозо-аммонийной среде...46
2.2.2 Культивирование на мелассе...47
2.3 Выделение и очистка ферментов...47
2.4 Определение молекулярной массы и изоэлектрофокусирование...48
2.5 Контроль активности ферментов...48
2.5.1 Контроль активности лакказы...49
2.5.2 Контроль активности лигнинпероксидазы...49
2.5.3 Контроль активности марганецпероксидазы...49
2.5.4 Определение активности целлобиозодегидрогеназы...49
2.6 Кинетические измерения и pH-зависимость...50
2.6.1 Регистрация окисления ионов Мп2+ до Мп3+, катализируемого лакказой...50
2.6.2 Исследование продуктов реакции окисления ионов Мп +, катализируемой лакказой...51
2.7 Аналитические методы...51
2.7.1 Определение концентрации белка...51
2.7.2 Определение металлов...51
2.7.3 Определение углеводной части лакказ...52
2.8 Спектральные исследования...52
2.9 Масс-спектроскопические исследования...52
2.9.1 Расщепление белков...52
2.9.2 MALDI-массспектроскопия...53
2.9.3 Расчет данных...''...53
2.10 Электрохимические исследования...54
2.10.1 Приготовление электродов...54
2.10.2 Циклические вольтамперометрические измерения...54
2.10.3. Амперометрические исследования биосенсоров...55
2.10.4 Определение окислитиелъно-восстановителъного потенциала Т1 центра лакказы...55
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...57
3.1 Выделение и очистка ферментов лигнинолитического комплекса
базидиомицета trametes pubescens...57
3.2. Физико-химические свойства ферментов лигнинолитического комплекса базидиомицета trametes pubescens...61
3.2.1 Основные биохимические свойства ферментов...61
3.2.2 Основные спектральные свойства ферментов...64
3.3 Сравнительные исследования двух множественных форм лакказ базидиомицета trametes pubescens...70
3.3.1 Исследование субстратной специфичности, pH-оптимума и стабильности двух форм лакказ...70
3.3.2 Электрохимические исследования двух форм лакказ...73
3.3.3 Масс-спектроскопические исследования двух форм лакказ...79
3.4 Изучение синергизма действия лигнинолитических ферментов базидиомицета trametes pubescens при деградации модельных соединений лигнина...81
3.4.1 Ионы Мп2+ - нетрадиционный субстрат лакказы гриба Т. pubescens...81
3.4.2 Изучение синергизма действия лигнинолитических ферментов базидиомицета Trametes pubescens...88
3.5 Разработка амперометрического биосенсора для определения фенольных соединений на основе частично очищенного препарата культурального фильтрата базидиомицета trametes pubescens...90
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ...96
ВЫВОДЫ...107
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ...108 |
|
Год |
Страниц |
Стоимость |
| 2006 |
108 |
290 рублей |
|
|
